2018 年，本院於劍橋國際幹細胞研討會中，發表了自主研發之無血清培養基（HELENE Medium）的相關成果。
其一，在相同培養期間內，HELENE Medium 可培養出較其他市售培養基更多的細胞；
其二，以 HELENE Medium 培養的間質幹細胞，其細胞尺寸最小。相關學術研究指出，幹細胞尺寸越小，越不容易分化為纖維母細胞。
綜合上述研究結果，本院確立從耳後採集含有間質幹細胞（MSCs）的脂肪組織。雖然與大腿或腹部相比，採集的脂肪量較少，但透過HELENE獨家的實驗室技術和HELENE培養基，能於一個月內培養多達22.5億個MSCs。
為讓所有患者都能安心接受治療，HELENE對幹細胞的品質與安全性進行全面嚴格的驗證，我們委託外部檢測機構，針對本院培養的幹細胞樣本(與本品質證明書所載相同製程)進行檢測。 檢測依循優良製造規範（GMP）及再生醫療優良實驗室規範（GLP），並包含三項自家設定的試驗。 本院亦會在院內實驗室完成同等檢測並確認品質後，再將細胞提供予患者。本頁同時載明由第三方檢測機構以公正、客觀的方式，驗證本院提供予患者之幹細胞品質的檢測結果。
檢測使用三位患者提供的耳後脂肪組織樣本，經本院實驗室完成細胞分離並進行培養後送交檢驗。 HELENE運用特殊處理技術及專用酵素進行組織分離與分解，以取得單一細胞。細胞經過一月培養並達到規定數量後，再使用 MACS 磁性細胞分選系統進行分選。 完成分選後，以自動細胞計數器確認細胞數量，最終將樣本送交第三方檢測機構 Takara Bio Inc.進行檢測。
| 測試目標 | 測試名稱 | 規格範例 | 結果 |
|---|---|---|---|
| 是否有感染源或污染源 | 微生物檢測 （日本藥典直接法；選配項目：檢測方法適用性試驗） |
QC_AL Lot:#13349 | 陰性 |
| 無菌試驗 （日本藥典直接法） |
QC_AL Lot:#13349 | 陰性 | |
| 黴漿菌否定試驗 （依日本藥典參考資訊之 PCR 法；已確認可檢出7種黴漿菌） |
QC_AL Lot:#13349 | 陰性 | |
| 內毒素試驗 （日本藥典動力學濁度法；選配項目：干擾因子試驗） |
QC_AL Lot:#13349 | 陰性 | |
| 內毒素試驗 （日本藥典動力學濁度法） |
QC_AL Lot:#13349 | 低於偵測極限 | |
| 腫瘤生成 | 集落形成試驗 | QC_AL Lot:#13349 | 陰性 |
| 確認是否為幹細胞 | 流式細胞儀分析（FCM） （CD45−／CD105＋） |
QC_AL Lot:#13349 | CD45- 92.1％ CD105+ 100% |
上圖為脂肪組織的示意圖，其中如豆狀般圓形部分為脂肪細胞。幹細胞則存在於稱為「幹細胞微環境（Stem Cell Niche）」的纖維網狀結構中。 換言之，幹細胞並不存在於脂肪細胞內的脂滴中，而是分布於脂肪細胞周圍的纖維性組織中。
以下將進一步比較耳後脂肪與腹部脂肪於組織結構上的差異
| 耳後脂肪 | 腹部皮下脂肪 | |
| 外觀照片 |  |
 |
| 示意圖 |  |
 |
| 疼痛感 | 輕微 | 劇烈（如瘀青一般的疼痛） |
| 瘀青 | 非常罕見 | 許多 |
| 加壓止血 | 僅需以 OK 繃加壓 (恢復時間短) |
以紗布加壓 (恢復時間長) |
脂肪來源幹細胞並不存在於脂滴中，而是分布於脂肪細胞周圍稱為「間質」的纖維狀組織中，也就是幹細胞微環境（Stem Cell Niche）。
耳後脂肪與腹部脂肪中皆含有幹細胞，但相較之下，耳後脂肪的脂滴較少、且幹細胞微環境（間質）更為豐富，因此被認為是在幹細胞的''品質''與''數量''方面更具優勢的採取部位。
HELENE主要採取耳後脂肪細胞，以降低患者在細胞採取過程中的疼痛與身體負擔。
如患者希望從腹部採取，本院亦能透過腹部脂肪抽吸的方式取得脂肪組織。
於 HELENE 細胞培養中心完成培養的幹細胞，在提供予患者進行治療前，都至少會經過兩階段的檢測，以確認細胞數量與存活率。
檢測結果皆於實驗室中經審核確認並列印歸檔保存。
我們以科學且負責任的方式，為每位患者提供經嚴格品質確認的細胞。
取得細胞樣本後，加入0.4%台盼藍溶液進行染色。台盼藍溶液是一種常用於區分活細胞與死細胞的活體染劑，此方法稱為「染劑排除法」。 台盼藍可穿透細胞膜受損的死細胞，使其呈現藍色；細胞膜完整的活細胞則會排斥染劑而不被染色。藉由辨識兩者的染色差異，即可計算細胞存活率。 傳統方式是以顯微鏡觀察染色後的樣本，再由科研人員人工計數；本院則使用自動細胞計數器，自動辨識細胞的染色情形並進行影像分析與計數。 人工計數時，除了需要手動調整焦距，也必須依不同樣本調整視野的照明強度。Countess II FL 自動細胞計數器則可自動調整照明與焦距，在每次檢測時取得最適合用於分析的影像品質。
使用 Countess II FL 完成細胞初步測量後，HELENE 細胞培養中心會將細胞樣本置於載玻片上，並使用 ZEISS Axio Vert.A1 倒立式顯微鏡取得細胞影像。 透過HELENE獨家研發並取得專利的AI影像分析技術，辨識細胞形態及細胞骨架等特徵，並綜合顯微鏡焦距、細胞種類（MSC）及細胞培養皿的培養面積等數據，進一步分析細胞數量與存活率。 透過兩階段的測量與交叉比對，進一步提升細胞計數與存活率判讀的精準度。此套細緻且高專業度的品質確認流程，有助於確保 HELENE 所提供的治療用等級幹細胞符合既定品質標準，並依患者的治療計畫進行適切的細胞製備。
HELENE Clinic 每次為患者提供治療前，院內細胞培養中心皆會進行嚴格的流程管理與檢測，並提供幹細胞品質證明書，其中詳細記載細胞數量、存活率、表面標記物等細胞品質指標之關鍵數據，此外，證明書也涵蓋細胞保存狀態與可追溯性等資訊，以落實對細胞品質與資訊透明度的重視。 透過科學發法、負責任的品質管理流程，HELENE 致力於為每一位患者提供安心可靠的幹細胞治療服務
根據2021年發表的論文:〈The Safety of MSC Therapy over the Past 15 Years: A Meta-analysis〉，研究人員納入62項MSC臨床試驗進行分析，共涵蓋3,546名受試者。其中亦包含刊登於國際知名醫學期刊《The Lancet》的相關臨床研究。
研究中使用的間質幹細胞(MSC) 劑量依疾病、細胞來源、治療方式及研究設計而異， 在這些臨床試驗中，部分研究的MSC回輸數量超過5億個，也有部分甚至達到10億個。這些國際臨床研究顯示，MSC的回輸數量會依研究設計、治療目的及受試者狀況而有所不同，並釐清外界對高劑量MSC回輸的疑慮。
同時也證明HELENE與世界研究機構具有同等技術力
| Author | Year | Location | Dose | |
|---|---|---|---|---|
| Hess | 2017 | USA | 1200×106 cells | 12億個幹細胞 |
| Bartunek | 2013 | Belgium | 600 -1200×106 cells | 6億至12億個幹細胞 |
| Chanbers | 2017 | Australia | 1×109 cells | 10億個幹細胞/肺損傷 |
| Steinberg | 2017 | USA | 1×109 cells | 10億幹細胞/中風 |
| Igresias | 2021 | Mexico | 1×109 cells | 10億個幹細胞/肺損傷 |
| Matsuoka | 2024 | Japan | 1-2×109 cells | 20億幹細胞/抗衰老 |
從目前累積的大量臨床資料中，較少見到針對特定疾病採用低劑量細胞投予的案例，因此有研究推測，在部分情況下，較低劑量的間質幹細胞（MSC）可能無法達到預期效果。
隨著科學證據及研究不斷更新，未來仍有必要針對MSC治療方案、治療對象、細胞來源、培養流程及投予劑量等條件持續進行研究、改善與標準化，以便更準確地比較各項相關臨床試驗的結果。
在此之前，HELENE Clinic持續參考國際研究與臨床數據並依據患者的年齡、身體狀況及疾病情形，規劃不同的幹細胞與外泌體治療方案，並持續精進治療流程與安全管理，在醫師審慎評估下，為每位患者制定最適合的治療方案。
[資料來源] The safety of MSC therapy over the past 15 years: a meta-analysis.
https://doi.org/10.1186/s13287-021-02609-x
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